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食用菌米粒原种培养基的制作工艺
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广州佳环电器科技有限公司
食用菌米粒原种培养基的制作工艺
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及作业标准
一.应用培养基配方(可装容量:100ml瓶50瓶)
大米1300g 蛋白胨4g 酵母膏4g 磷酸二氢钾4g 硫酸镁 1.5g 水2500ml 杂木屑450g 麦麸100g 葡萄糖50g 石膏25g
培养基的调制、分装与灭菌
1.按配方比例精确称量各营养物质,补足水量,并加入蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钾、硫酸镁,充分溶解,将营养液连同大米一起置于电饭锅中,在锅内蒸煮至大米熟而不烂为止。
2.将杂木屑用窗纱过筛,连同麸皮、葡萄糖、石膏一起干混均匀,在大铝盆内同蒸煮后的大米饭混合搓揉,使之疏散为颗粒状,并使干物质完全吸附在大米的表面。
3.将调制好的颗粒基质,在盆内分装于100ml 规格的小瓶内,并用杵钩压成平面,要求上紧下松,装入量一般为50-60g,然后用打孔棒再在中央部位插一个空洞,孔径1公分,直达瓶底。打孔的目的有二:一是增加瓶内氧气通透;二是有利于菌丝沿着洞穴上下蔓延。最后将粘着在瓶口的基质擦洗干净,塞上棉塞。棉塞的松紧度要求适度,外观平滑,紧贴瓶颈,不能有沟纹,棉塞要塞至瓶颈基部或稍下。塞好棉塞后再用再用方块报纸把瓶口连同棉花塞包裹起来。
4.将制好的瓶子置于高压锅内,在0.5kg/cm2压力条件下,放冷空气两次,然后再在1.4kg/cm2压力条件下灭菌150分钟,当压力降到0时,将灭菌盖打开,利用里面的预热将棉塞烘干,取出待用。
菌种转接无菌操作规程及
作业标准
试管母种及米粒原种菌种转接在超净工作台内进行,使用超净工作台前,首先将工作台内杂物清除干净,再送入待接种的斜面培养基或米粒培养基,以及菌种和各种需用物品,检查是否齐全。一切准备工作做好后,关闭操作玻璃门,打开通风电源及紫外线灯,送风净化20---30分钟,然后才能接种操作
在接种前操作人员先用75%酒精棉球擦抹双手,然后打开操作玻璃门,双手伸进工作台。操作之前将双手再用酒精擦抹后点燃酒精灯进行接种操作。菌种转借移植无菌操作要注意如下几个方面的规程及标准:
1.左手所持的菌种试管及空白试管(或瓶)必须用酒精灯火焰封住管(瓶)口管口以火焰封住为好,不宜猛烧,以免导热破损。
2.琼脂斜面菌种的相互转接,种块规格为4×7mm,琼脂斜面转接100ml种瓶,种块规格为7×10㎜,琼脂块不能太厚,试管转试管约3-4㎜厚度为宜,试管转瓶约4-5㎜厚度为宜。转接移植时原菌种管种块附近的菌种老化快,不适宜做母种转接移植使用。
3.接种时菌种要准确的放在斜面中央稍后位置,每支试管放置种块的位置一致,这样可使发菌整齐,要注意菌块不能在斜面上到处滑动,母种转接至原种瓶的菌块要放在培养基的中间位置,菌丝面紧贴培养基质。
4.接种时右手所持的接种工具在接种前须在酒精火焰上灼烧,要在试管内壁冷却后方能接种,要防止接种温度过高,菌丝被灼烧的接种工具烫熔,粘连在接种工具上,难以脱离,并影响菌种恢复力。
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更新时间:2019-03-14 【
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